አንድ እርምጃ የHCV ሙከራ ካሴት(ሙሉ ደም/ሴረም/ፕላዝማ)
አንድ እርምጃ የHCV ፈተና (የሙሉ ደም/ሴረም/ፕላዝማ)
ማጠቃለያ
በኤች.ሲ.ቪ ኢንፌክሽንን የመለየት አጠቃላይ ዘዴ የቫይረሱ ፀረ እንግዳ አካላት መኖራቸውን በ EIA ዘዴ እና ከዚያም በዌስተርን ብሉት ማረጋገጥ ነው.የአንድ እርምጃ የኤች.ሲ.ቪ ምርመራ ቀላል፣ የእይታ የጥራት ምርመራ በሰው ሙሉ ደም/ሴረም/ፕላዝማ ውስጥ ፀረ እንግዳ አካላትን የሚለይ ነው።ምርመራው በimmunochromatography ላይ የተመሰረተ ሲሆን በ 15 ደቂቃ ውስጥ ውጤቱን ሊሰጥ ይችላል.
የታሰበ አጠቃቀም
የአንድ እርምጃ የኤች.ሲ.ቪ ምርመራ የኮሎይድል ወርቅ የተሻሻለ ፈጣን Immunochromatoraphic Assay የሄፐታይተስ ሲ ቫይረስ ፀረ እንግዳ አካላትን በጥራት ለማወቅ በሰው ሙሉ ደም/ሴረም/ፕላዝማ ነው።ይህ ምርመራ የማጣሪያ ፈተና ነው እና ሁሉም አዎንታዊ ነገሮች እንደ ዌስተርን ብሎት ያለ አማራጭ ፈተና በመጠቀም መረጋገጥ አለባቸው።ፈተናው የታሰበው ለጤና እንክብካቤ ባለሙያ ብቻ ነው።የፈተናውም ሆነ የፈተና ውጤቶቹ በህክምና እና በህግ ባለሙያዎች ብቻ ጥቅም ላይ እንዲውሉ የታቀዱ ናቸው፣ በአጠቃቀም ሀገር ውስጥ ባለው ደንብ ካልሆነ በስተቀር።ፈተናው ያለ ተገቢ ቁጥጥር ጥቅም ላይ መዋል የለበትም.
የሂደቱ መርህ
ምርመራው የሚጀምረው በናሙና ጉድጓድ ላይ በተተገበረ ናሙና እና ወዲያውኑ የቀረበውን ናሙና ማቅለጫ በመጨመር ነው.በናሙና ፓድ ውስጥ የተካተተው HCV አንቲጂን-ኮሎይድ ጎልድ conjugate በሴረም ወይም ፕላዝማ ውስጥ ካለው የ HCV ፀረ እንግዳ አካል ጋር ምላሽ ይሰጣል፣ ይህም ኮንጁጌት/ኤች.ሲ.ቪ ፀረ እንግዳ አካላትን ይፈጥራል።ውህዱ በሙከራው መስመር ላይ እንዲሰደድ ሲፈቀድ፣የኮንጁጌት/ኤች.ሲ.ቪ ፀረ እንግዳ አካላት ስብስብ በምርመራው ክልል ውስጥ ባለ ቀለም ባንድ በሚሰራ ሽፋን ላይ በማይንቀሳቀስ ፀረ ሰው-አስገዳጅ ፕሮቲን A ተይዟል።የኮሎይዳል ጎልድ ኮንጁጌት/HCV ፀረ እንግዳ አካላት ስብስብ ባለመኖሩ አሉታዊ ናሙና የሙከራ መስመር አያመጣም።በፈተናው ውስጥ ጥቅም ላይ የሚውሉት አንቲጂኖች ከኤች.ሲ.ቪ. በጣም የበሽታ መቋቋም አቅም ያላቸው ክልሎች ጋር የሚዛመዱ እንደገና የተዋሃዱ ፕሮቲኖች ናቸው።የፈተና ውጤቱ ምንም ይሁን ምን በመቆጣጠሪያው ክልል ውስጥ ባለ ቀለም መቆጣጠሪያ ባንድ በፈተና ሂደቱ መጨረሻ ላይ ይታያል.ይህ የቁጥጥር ባንድ የኮሎይድ ጎልድ ኮንጁጌት ከፀረ-ኤች.ሲ.ቪ. ፀረ እንግዳ አካላት ጋር በማያያዝ በገለባው ላይ የማይንቀሳቀስ ውጤት ነው።የመቆጣጠሪያው መስመር የሚያመለክተው የኮሎይድ ጎልድ ኮንጁጌት የሚሰራ መሆኑን ነው።የመቆጣጠሪያው ባንድ አለመኖር ፈተናው የተሳሳተ መሆኑን ያሳያል.
ሬጀንቶች እና ቁሳቁሶች የቀረቡ
የሙከራ መሣሪያ በተናጠል በማድረቂያ ቦርሳ የታሸገ ፎይል
• የፕላስቲክ ነጠብጣብ.
• ናሙና ማቅለጫ
• ጥቅል አስገባ
አስፈላጊ ቁሳቁሶች ግን አልተሰጡም።
አወንታዊ እና አሉታዊ መቆጣጠሪያዎች (እንደ የተለየ ንጥል ይገኛል)
ማከማቻ እና መረጋጋት
የሙከራ ቁሳቁሶቹ በ2-30 ℃ በታሸገ ቦርሳ ውስጥ እና በደረቅ ሁኔታ ውስጥ መቀመጥ አለባቸው።
ማስጠንቀቂያዎች እና ጥንቃቄዎች
1) ሁሉም አዎንታዊ ውጤቶች በአማራጭ ዘዴ መረጋገጥ አለባቸው.
2) ሁሉንም ናሙናዎች ተላላፊ ሊሆኑ እንደሚችሉ አድርገው ይያዙ።ናሙናዎችን በሚይዙበት ጊዜ ጓንት እና መከላከያ ልብስ ይልበሱ.
3) ለሙከራ የሚያገለግሉ መሳሪያዎች ከመውሰዳቸው በፊት በራስ-ሰር ክላቭ ማድረግ አለባቸው።
4) የኪት ቁሳቁሶችን ከማብቂያ ጊዜያቸው በላይ አይጠቀሙ.
5) ሬጀንቶችን ከተለያዩ ዕጣዎች አይለዋወጡ።
የናሙና ስብስብ እና ማከማቻ
1) መደበኛ ክሊኒካዊ የላቦራቶሪ ሂደቶችን በመከተል ሙሉ ደም / ሴረም / ፕላዝማ ናሙናዎችን ይሰብስቡ.
2) ማከማቻ፡- ሙሉ ደም ሊቀዘቅዝ አይችልም።አንድ ናሙና በተሰበሰበበት ቀን ጥቅም ላይ ካልዋለ ማቀዝቀዝ አለበት.ናሙናዎች ከተሰበሰቡ በ 3 ቀናት ውስጥ ጥቅም ላይ ካልዋሉ በረዶ መሆን አለባቸው.ከመጠቀምዎ በፊት ናሙናዎቹን ከ 2-3 ጊዜ በላይ ማቀዝቀዝ እና ማቅለጥ ያስወግዱ.0.1% የሶዲየም አዚድ የምርመራውን ውጤት ሳይነካው እንደ መከላከያ ወደ ናሙና ሊጨመር ይችላል.
የ ASSAY ሂደት
1) ለናሙናው የተዘጋውን የፕላስቲክ ጠብታ በመጠቀም 1 ጠብታ (10μl) ሙሉ ደም/ሴረም / ፕላዝማ ወደ ለሙከራ ካርዱ ክብ ናሙና በደንብ ያቅርቡ።
2) ናሙናው ከተጨመረ በኋላ ወዲያውኑ 2 ጠብታ የናሙና ዳይሉየንት ጠብታዎች ከ dropper tip diluent vial (ወይም ሁሉንም ይዘቶች ከአንድ የሙከራ አምፑል) ይጨምሩ።
3) የፈተና ውጤቶችን በ 15 ደቂቃዎች መተርጎም.
ማስታወሻዎች፡-
1) ትክክለኛ የፈተና ውጤት ለማግኘት በቂ መጠን ያለው የናሙና ማሟያ መተግበር አስፈላጊ ነው።ከአንድ ደቂቃ በኋላ ፍልሰት (የሜምብራን እርጥበት) በሙከራ መስኮቱ ውስጥ ካልታየ, አንድ ተጨማሪ የሟሟ ጠብታ ወደ ናሙናው ጉድጓድ ውስጥ ይጨምሩ.
2) ከፍተኛ የ HCV ፀረ እንግዳ አካላት ላለው ናሙና አንድ ደቂቃ ያህል አዎንታዊ ውጤቶቹ ሊታዩ ይችላሉ።
3) ከ20 ደቂቃ በኋላ ውጤቱን አትተርጉም።
የፈተናውን ውጤት ማንበብ
1)አዎንታዊ: ሁለቱም ሐምራዊ ቀይ የፈተና ባንድ እና ወይንጠጅ ቀይ መቆጣጠሪያ ባንድ በገለባው ላይ ይታያሉ።ዝቅተኛ ፀረ እንግዳ አካላት, የሙከራ ባንድ ደካማ ይሆናል.
2) አሉታዊበገለባው ላይ የሚታየው ሐምራዊ ቀይ መቆጣጠሪያ ባንድ ብቻ ነው።የሙከራ ባንድ አለመኖር አሉታዊ ውጤትን ያመለክታል.
3)ልክ ያልሆነ ውጤት፡የፈተና ውጤቱ ምንም ይሁን ምን በመቆጣጠሪያ ክልል ውስጥ ሁል ጊዜ ሐምራዊ ቀይ መቆጣጠሪያ ባንድ መኖር አለበት።የመቆጣጠሪያ ባንድ ካልታየ ፈተናው ልክ እንዳልሆነ ይቆጠራል።አዲስ የሙከራ መሣሪያ በመጠቀም ሙከራውን ይድገሙት።
ማሳሰቢያ፡ በግልጽ የሚታይ እስከሆነ ድረስ በትንሹ የቀለለ የመቆጣጠሪያ ባንድ በጣም ጠንካራ የሆኑ አዎንታዊ ናሙናዎች መኖሩ የተለመደ ነው።
LIMITATION
1) በዚህ ፈተና ውስጥ ግልጽ፣ ትኩስ፣ ነጻ የሚፈስ ሙሉ ደም/ሴረም/ፕላዝማ ብቻ መጠቀም ይቻላል።
2) ትኩስ ናሙናዎች ምርጥ ናቸው ነገር ግን የቀዘቀዙ ናሙናዎችን መጠቀም ይቻላል.አንድ ናሙና በረዶ ከሆነ, በአቀባዊ አቀማመጥ እንዲቀልጥ እና ፈሳሽ መኖሩን ማረጋገጥ አለበት.ሙሉ ደም ሊቀዘቅዝ አይችልም.
3) ናሙናውን አያበሳጩ.ናሙናውን ለመሰብሰብ ከናሙናው ወለል በታች ያለውን ፒፕት ያስገቡ።
