የኔዘርላንድ ተመራማሪዎች CRISPR እና bioluminescenceን በሙከራ ሙከራ ያዋህዳሉተላላፊ በሽታዎች

በኔዘርላንድስ የሚገኙ ተመራማሪዎች እንደሚሉት አዲስ የተሻሻለ የምሽት ፕሮቲን የቫይረስ በሽታዎችን ለይቶ ማወቅን ያፋጥናል እና ቀላል ያደርገዋል።
ጥናታቸው እሮብ በኤሲኤስ ህትመቶች ላይ የታተመው የቫይራል ኑክሊክ አሲዶችን እና ቁመናቸውን የሚያበሩ ሰማያዊ ወይም አረንጓዴ ፕሮቲኖችን በመጠቀም ሚስጥራዊነት ያለው ባለ አንድ እርምጃ ዘዴን ይገልፃል።
በሽታ አምጪ ተህዋሲያን የኒውክሊክ አሲድ አሻራቸውን በመለየት መለየት በክሊኒካዊ ምርመራ፣ ባዮሜዲካል ምርምር እና የምግብ እና የአካባቢ ደህንነት ክትትል ውስጥ ቁልፍ ስልት ነው።በሰፊው ጥቅም ላይ የዋለው የቁጥር ፖሊሜሬሴ ሰንሰለት ምላሽ (PCR) ሙከራዎች በጣም ስሜታዊ ናቸው፣ ነገር ግን የተራቀቀ የናሙና ዝግጅት ወይም የውጤት ትርጓሜ ያስፈልጋቸዋል፣ ይህም ለአንዳንድ የጤና እንክብካቤ መቼቶች ወይም በንብረት-ውሱን ቅንብሮች ላይ ተግባራዊ ሊሆኑ አይችሉም።
ይህ የኔዘርላንድስ ቡድን ፈጣን፣ ተንቀሳቃሽ እና ለአጠቃቀም ቀላል የሆነ የኑክሊክ አሲድ መመርመሪያ ዘዴን ለማዘጋጀት በዩኒቨርሲቲዎች እና በሆስፒታሎች የሳይንስ ሊቃውንት መካከል ያለው ትብብር ውጤት ነው።
እነሱ በእሳታማ የዝንብ ብልጭታዎች፣ በፋየር ፍላይ ፍላይዎች፣ እና በውሃ ውስጥ በሚገኙ ፋይቶፕላንክተን ትንንሽ ኮከቦች ተመስጧዊ ናቸው፣ ሁሉም ባዮሊሚንሴንስ በተባለ ክስተት የተጎለበተ ነው።ይህ የጨለመ-ውስጥ-ውስጥ ተፅእኖ የተፈጠረው የሉሲፈራዝ ​​ፕሮቲንን በሚያካትት ኬሚካላዊ ምላሽ ነው።ሳይንቲስቶቹ ኢላማ ሲያገኙ ምልከታን ለማመቻቸት ብርሃን በሚያመነጩ ሴንሰሮች ውስጥ የሉሲፈራዝ ​​ፕሮቲኖችን አካትተዋል።ይህ እነዚህ ዳሳሾች ለእንክብካቤ ማወቂያ ተስማሚ ቢያደርጋቸውም፣ በአሁኑ ጊዜ ለክሊኒካዊ ምርመራ ሙከራዎች የሚያስፈልጋቸው ከፍተኛ ትብነት የላቸውም።የ CRISPR የጂን አርትዖት ዘዴ ይህንን አቅም ሊሰጥ ቢችልም ውስብስብ እና ጫጫታ ባላቸው ናሙናዎች ውስጥ ሊኖር የሚችለውን ደካማ ምልክት ለመለየት ብዙ እርምጃዎችን እና ተጨማሪ ልዩ መሳሪያዎችን ይፈልጋል።
ተመራማሪዎች ከ CRISPR ጋር የተያያዘ ፕሮቲን ከባዮሊሚንሰንት ምልክት ጋር በቀላል ዲጂታል ካሜራ ሊገኙ የሚችሉበትን መንገድ አግኝተዋል።ለመተንተን በቂ የሆነ የአር ኤን ኤ ወይም የዲ ኤን ኤ ናሙና መኖሩን ለማረጋገጥ ተመራማሪዎቹ ሬኮምቢናሴ ፖሊሜሬሴስ አምፕሊፊኬሽን (RPA) አከናውነዋል።አዲስ መድረክ ፈጠሩ Luminescent ኑክሊክ አሲድ ዳሳሽ (LUNAS)፣ በዚህ ውስጥ ሁለቱ CRISPR/Cas9 ፕሮቲኖች ለተለያዩ የቫይራል ጂኖም ተያያዥ ክፍሎች የተለዩ ናቸው፣ እያንዳንዱም ልዩ የሆነ የሉሲፈራዝ ​​ቁርጥራጭ ከላይ ጋር ተያይዟል።
መርማሪዎቹ የሚመረመሩት ልዩ የቫይረስ ጂኖም ሲገኝ፣ ሁለት CRISPR/Cas9 ፕሮቲኖች ከታቀደው የኑክሊክ አሲድ ቅደም ተከተል ጋር ይጣመራሉ።በቅርበት ይቀራረባሉ፣ ይህም ያልተነካ የሉሲፈራዝ ​​ፕሮቲን እንዲፈጠር እና የኬሚካል ንኡስ ክፍል ባለበት ሰማያዊ ብርሃን እንዲፈነጥቅ ያስችላቸዋል።.በዚህ ሂደት ውስጥ ጥቅም ላይ የዋለውን ንጥረ ነገር ለመለካት ተመራማሪዎቹ አረንጓዴ ብርሃን የሚያመነጨውን የቁጥጥር ምላሽ ተጠቅመዋል።ከአረንጓዴ ወደ ሰማያዊ ቀለም የሚቀይር ቱቦ አወንታዊ ውጤትን ያሳያል.
ተመራማሪዎቹ የ RPA-LUNAS assayን በማዘጋጀት መድረኩን ሞክረዋል, ይህም የሚያገኝ ነውSARS-CoV-2 አር ኤን ኤያለ አድካሚ የአር ኤን ኤ መነጠል፣ እና በ nasopharyngeal swab ናሙናዎች ላይ የምርመራ ውጤቱን አሳይቷል።ኮቪድ 19ታካሚዎች.RPA-LUNAS በ 20 ደቂቃ ውስጥ የአር ኤን ኤ ቫይረስ ጭነት እስከ 200 ቅጂ/μL ባለው ናሙና ውስጥ SARS-CoV-2ን በተሳካ ሁኔታ አግኝቷል።
ተመራማሪዎቹ የእነሱ ምርመራ ሌሎች ብዙ ቫይረሶችን በቀላሉ እና ውጤታማ በሆነ መንገድ እንደሚያውቅ ያምናሉ."RPA-LUNAS ለነጥብ እንክብካቤ ተላላፊ በሽታ ምርመራ ማራኪ ነው" ሲሉ ጽፈዋል.